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一、初始水温控制 水温对水中微生物生长和生化耗氧率有很大影响： 因此，在整个测量过程中，水样的温度应严格控制在20℃±1℃，以保证测量结果的精密度和准确度。 (1) 低温水样： 冬季采集的水样、冷藏保存水样和冷冻保存水样的温度远低于20℃，可以用温度计控制，敞口放入在20℃恒温水浴锅中进行快速升温并达到平衡。当水温达到要求（20±1℃）时，重新测量以减少分析误差。 (2)高温水样： 夏季采集水样和加热污染水样的温度往往高于20℃，可用温度计控制，置于20℃恒温生化培养箱中快速降温并达到平衡。当水温达到要求（20±1℃）时，重新测量以减少分析误差。 二、水样的pH值调节 水中的大部分微生物都适合在中性或弱碱性（pH=7.2～7.6）的环境中生存。 如果磷酸盐缓冲溶液用水稀释，将无法达到足够的缓冲效果。 首先用pH计或广泛的pH试纸测试pH值，用盐酸溶液[c(HCl)=0.5mol/L]或氢氧化钠溶液[c(NaOH)=0.5mol/L]调节水样的pH值呈中性或弱碱性后稀释。调节液的用量不应超过水样体积的0.5%，操作时注意不要引入气泡。 如果水样的酸度或碱度很高，可以用高浓度的碱液或酸液进行中和。 三、水样含盐量调整 微生物分解有机物的生化反应必须在营养盐充足的环境中进行。 如果样品含盐量低，电导率小于125μs/cm，则可能因营养盐不足而影响微生物活性，从而影响水样BOD5测定结果。 因此，测量前应先用电导率仪检测水样的电导率，并在含盐量低（电导率小于125μs/cm）的水样中加入等体积的四种盐溶液，水样的电导率应调整为 125μs/cm。 四、初始溶解氧调节 微生物分解有机物的生化反应必须在好氧条件下进行。溶解氧浓度影响反应进程。 测量前，必须严格控制水样的初始溶解氧浓度。 ①若水样初始溶解氧浓度低于2.0mg/L：可采用稀释或接种稀释法提高水样溶解氧浓度。（原因：未能为微生物的生理生化活动提供足够的溶解氧，使生化反应难以进行）。 ②溶解氧过饱和：从水温低的水域（冬季）或富营养化湖泊、水库采集的水样中可能含有过饱和溶解氧。 测量前，通过初始水温调节水样，使水样快速升温至20℃，然后将所有水样转移至1000mL量筒中，然后摇动量筒5 至 10 次以驱除过饱和溶解氧。否则会造成分析结果偏高（过饱和溶解氧会自行逸出而损失）。 ③负值现象： 从水温高的水域（夏季）或热污染排放口采集水样。在溶解氧浓度低的情况下，通过测量前的初始水温调节水样，使水样快速冷却至20℃，将水样全部转移至1000 mL量筒中，摇动量筒5～10次，利用大气复氧作用使其与空气中氧分压接近平衡。否则，会造成分析结果偏低甚至为负。
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